El breve proceso de purificación posterior de la vacuna contra la fiebre aftosa

La fiebre aftosa es una enfermedad infecciosa aguda, cálida y muy contagiosa causada por el virus de la fiebre aftosa, que puede afectar a casi todos los animales de pezuña hendida (cerdos, bovinos y ovinos, etc.). Es la enfermedad animal más infecciosa encontrada hasta el momento y la más perjudicial para la ganadería.

 

Las principales vías de transmisión de la fiebre aftosa son el tracto digestivo y respiratorio, la piel dañada, las mucosas y la piel intacta (p. ej., la piel de la mama), las mucosas (conjuntiva ocular). También puede transmitirse por el aire, así como por la orina, la leche, el semen y la saliva. La prevención y el control de la fiebre aftosa en nuestro país se realiza principalmente mediante la vacunación, y se persiguen los brotes de fiebre aftosa. La vacunación es un medio eficaz de prevención específica de la fiebre aftosa.

 

La vacunación es un medio fiable y eficaz de prevención específica de la fiebre aftosa, y una vacuna segura y eficaz es un requisito previo para la prevención, el control y la eliminación final de la fiebre aftosa. Las vacunas atenuadas e inactivadas y otras vacunas convencionales tienen buena inmunogenicidad y desempeñan un papel importante en la prevención y el control de la fiebre aftosa. Sin embargo, los brotes de fiebre aftosa en algunas partes del mundo parecen estar relacionados con el virus vivo residual en las vacunas inactivadas debido a factores inseguros como la fuerte virulencia viral, la inactivación incompleta de los virus y el escape de los virus vivos de las plantas de procesamiento. Esto impulsa la búsqueda de una vacuna contra la fiebre aftosa más segura y eficaz. Con el rápido desarrollo de la tecnología de biología molecular, están surgiendo vacunas de ingeniería genética del virus de la fiebre aftosa (FMDV), como la vacuna de subunidades, la vacuna para uso alimentario, la vacuna de péptidos sintéticos, la vacuna portadora de proteínas, la vacuna de deleción de genes, la vacuna portadora viva, la vacuna de ácido nucleico, etc.

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Proceso de producción de la vacuna atenuada/inactivada contra la fiebre aftosa

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Tecnología de producción de vacunas genéticamente modificadas contra el virus de la fiebre aftosa

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Filtración de clarificación

 

Membrana de filtración profunda: La tecnología de filtración se utiliza ampliamente en el proceso de producción de productos biológicos como las vacunas, entre las cuales la tecnología de filtración DC se utiliza generalmente en el proceso de recolección de veneno de la enfermedad para separar impurezas insolubles como los restos celulares. En la clarificación temprana del FMDV, se adoptó principalmente la tecnología de filtración de superficie representada por el elemento de filtro de membrana plegable. Con el cambio de las condiciones de cultivo, el aumento de las impurezas de los restos celulares, la filtración de superficie es difícil de lograr el efecto de clarificación y, debido a que la carga de filtración de superficie es baja, el costo de los materiales de filtro es cada vez mayor.

En el contexto anterior, la filtración profunda se ha aplicado cada vez más en el proceso de separación de citolíquidos de FMDV, y es uno de los métodos de recolección más utilizados en la actualidad. La membrana de filtrado profundo suele estar compuesta de celulosa, coadyuvantes de filtrado porosos (como tierra de diatomeas) y coadyuvantes de filtrado de iones con carga positiva, y los canales formados después de la película suelen ser muy tortuosos, similares a la estructura de abertura de laberinto. Las partículas de impurezas suelen quedar atrapadas dentro del material de filtrado en lugar de en la superficie, y la pared del canal de filtrado suele absorber algunas impurezas de partículas extremadamente finas por acción electrostática o fuerza intermolecular. Debido a la adición de algunos coadyuvantes de filtrado, la filtración profunda también puede eliminar algunas impurezas solubles, reduciendo así la presión de los pasos de purificación posteriores.

 

Sin embargo, cuando la escala de cultivo es demasiado grande, se requerirá una gran cantidad de membranas de filtrado profundo, lo que resultará en un aumento sustancial en el costo de los consumibles. Al mismo tiempo, la alta densidad del cultivo celular reducirá la carga de la membrana de filtrado profundo, lo que resultará en un aumento de los costos y una dilución excesiva del producto.

Microfiltración Método de microfiltración, el uso principal del dispositivo de filtración de flujo tangencial, los componentes de la membrana son casete de membrana plana y fibra hueca. La filtración de flujo tangencial (TFF) es impulsada por la diferencia de presión transmembrana. Las sustancias e impurezas más pequeñas que el tamaño de poro de la membrana pasan a través de la membrana, mientras que las impurezas como las células con partículas más grandes quedan atrapadas. El tamaño de poro de la membrana utilizada para la microfiltración es {{0}}.45/0.22μm. La microfiltración de flujo tangencial de fibra hueca puede procesar directamente líquidos con alto contenido de sólidos, como medios de cultivo celular de alta densidad, puede eliminar los pasos de centrifugación y prefiltración, menos pasos, operación simple, la membrana se puede usar repetidamente a través de la limpieza, reduciendo la inversión en equipos y los costos operativos, en línea con los requisitos de la producción automatizada modular.

 

Ultrafiltración(Cambio de concentración)

 

La ultrafiltración puede eliminar algunos pesos moleculares pequeños de proteínas diversas e impurezas relacionadas con el proceso, como los inactivadores, y reducir en gran medida el volumen del líquido recolectado, lo que favorece las operaciones de proceso posteriores. El método de ultrafiltración, el uso principal del dispositivo de filtración de flujo tangencial, los componentes de membrana tienen envoltura de membrana y fibra hueca dos, en circunstancias normales, la aplicación del sistema de ultrafiltración puede hacer que la concentración de virus sea más de 100 veces, la tasa de eliminación de proteínas diversas hasta 99%. Entre ellos, los componentes de membrana de fibra hueca tienen las ventajas de fuerza de corte suave y baja, no es fácil de taponar, operación flexible, larga vida útil y bajo costo, y fácil de agrandar, por lo que se recomienda elegir fibra hueca para el enriquecimiento y purificación de virus.

Al utilizar el método de ultrafiltración para concentrar líquidos, es muy importante seleccionar una abertura de membrana adecuada, que determina directamente la eficiencia de la concentración y la calidad del producto. Por un lado, es necesario seleccionar la abertura de membrana para atrapar eficazmente las moléculas objetivo para garantizar el rendimiento y, por otro lado, se debe considerar plenamente el efecto de eliminación y la velocidad de procesamiento de las heteroproteínas. Por lo tanto, el mejor principio es seleccionar la membrana con el tamaño de poro más grande que pueda atrapar la molécula objetivo y tratar de seleccionar la membrana de filtro con una distribución uniforme del tamaño de poro.

En el caso de las vacunas atenuadas o inactivadas contra la fiebre aftosa, se suele utilizar una membrana de ultrafiltración con una apertura de 100-750 kd para completar la intercepción del virus de la fiebre aftosa. En el caso de las vacunas genéticamente modificadas contra la fiebre aftosa, se suele seleccionar una apertura de membrana de 3-6 veces (preferiblemente 5 veces) el peso molecular de la sustancia de destino.

 

GuiandoTecnología

Hangzhou Guidling Technology Co., Ltd. es una empresa nacional de alta tecnología orientada a la producción que se centra en la clarificación, separación y purificación de productos biofarmacéuticos. Los productos se utilizan ampliamente en procesos de filtración de vacunas, anticuerpos monoclonales, diagnósticos, productos sanguíneos, suero, endotoxinas y otros productos biológicos. Contamos con "casete de membrana plana", "columna de fibra hueca", "dispositivo de filtrado de flujo tangencial", "filtro de virus", "pila de membrana profunda", "filtro de bacterias" y otros productos. Contamos con una amplia gama de líneas de productos, desde pequeños sistemas de filtración de laboratorio desechables hasta sistemas de filtración de producción, para satisfacer las necesidades de prueba y producción. ¡Guidling Technology espera cooperar con usted!

 

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