La ultrafiltración puede retener la actividad biológica y ahorrar tiempo
La ultrafiltración puede retener la actividad biológica y ahorrar tiempo. La tecnología de purificación de proteínas se ha desarrollado a partir de varios métodos de precipitación química para el enriquecimiento de muestras o métodos de diálisis para el intercambio de tampones al sistema de flujo cruzado de purificación impulsado por presión utilizando membrana de ultrafiltración. La tecnología de ultrafiltración (UF) se basa en el uso de membranas poliméricas con tamaños de poro definidos de alto nivel para separar las moléculas según el tamaño. En resumen, el paso de ultrafiltración (UF) utiliza presión líquida para promover la transferencia de moléculas más pequeñas a través de la membrana de ultrafiltración (UF) e interceptar moléculas más grandes al mismo tiempo.
El método de precipitación química se puede utilizar para concentrar muestras de proteínas. La separación basada en la ultrafiltración se basa más en la acción mecánica que en la reacción química. Los investigadores pueden concentrar muestras sin agregar solventes o sales desnaturalizadas. El intercambio de búfer mediante tecnología de diálisis utiliza una gran cantidad de búfer. Dado que la única fuerza que actúa sobre el disolvente es la fuerza de difusión, el proceso durará varios días. El dispositivo de ultrafiltración premontado y fácil de usar puede realizar rápidamente los pasos de concentración o intercambio de búfer sin el engorroso proceso de tratamiento requerido por muchas otras tecnologías.
La ultrafiltración se puede implementar en cualquiera de los siguientes dos modos de operación: filtración de flujo directo (DFF) o filtración de flujo tangencial (TFF, figura 1). DFF tiene un buen efecto en el proceso de tratamiento de flujo pequeño (hasta 30 ml) con dispositivo centrífugo, pero la tecnología DFF se verá afectada negativamente por el problema del bloqueo de la membrana. Para reducir la formación de la capa coloidal, se puede utilizar una configuración de varilla de agitación flotante (tanque de agitación) o se puede generar un flujo cruzado en el lado aguas arriba del diafragma generando un flujo laminar controlado. El funcionamiento de la varilla de agitación puede mejorar el efecto de ultrafiltración, pero todavía hay limitaciones para obtener el mejor rendimiento. Debido a que la velocidad de agitación y el nivel de sincronización dependen del rango de giro del cuerpo de la varilla, y este rango cambiará con el cambio del radio de giro.