La tecnología Guidling le lleva a aprender el método simple y eficiente de desalinización y concentración
Las proteínas a menudo necesitan ser desaladas después de la separación y purificación, y estas sales se derivan principalmente de varios iones en organismos vivos (por ejemplo, iones de sodio, iones de potasio, iones de cloruro, etc.), así como sales tampón en los extractos, sales en los eluyentes y componentes salinos de ciertos desnaturalizantes utilizados en experimentos. Las altas concentraciones de sal pueden afectar la actividad y estabilidad de las proteínas, así como sus interacciones con otras moléculas, generando señales de interferencia o reduciendo la precisión de las mediciones en métodos analíticos posteriores, como la electroforesis, la espectrometría de masas y los estudios cristalográficos. Por lo tanto, es muy necesario desalar las proteínas purificadas después de la separación, y los principales métodos de desalación utilizados a menudo son la cromatografía de membrana (diálisis y ultrafiltración) y filtración en gel. Además, en algunos casos, la desalinización también se puede conseguir mediante dilución.
La desalinización por diálisis, debido al largo ciclo y a la necesidad de una gran cantidad de líquido de reposición, su aplicación se ha visto muy restringida, siendo menos utilizada en la industria, pero principalmente utilizada en parte en el laboratorio, el laboratorio también se está sustituyendo paulatinamente por tubos de ultrafiltración. /taza de ultrafiltración.
La principal tecnología de separación por membrana utilizada en el proceso de desalación y concentración de proteínas es la ultrafiltración. La ultrafiltración es una tecnología de separación por membrana con alta eficiencia, bajo consumo de energía, sin cambio de fase, sin necesidad de agregar reactivos químicos, fácil operación, condiciones suaves, la capacidad de mantener mejor la actividad de las macromoléculas biológicas, alta tasa de recuperación y otras ventajas. , y su uso en la separación y purificación de proteínas tiene ventajas únicas.
La ultrafiltración es un método de filtración por membrana que utiliza una membrana porosa como medio de separación y se basa en la diferencia de presión entre los dos lados de la membrana como fuerza impulsora para separar sustancias de diferentes pesos moleculares en solución, desempeñando así un papel en la desalinización, concentración. y purificación. Se trata de un nuevo método desarrollado en los últimos años, que resulta más adecuado para la concentración o desalinización de macromoléculas biológicas, especialmente proteínas y enzimas. La clave para la aplicación de la ultrafiltración es la elección de la membrana, los diferentes tipos y especificaciones de la membrana, tienen la diferencia en el caudal de agua, el límite de peso molecular y otros parámetros, se deben seleccionar de acuerdo con las necesidades de trabajo relevantes. Además, la forma del dispositivo de ultrafiltración, la composición y propiedades del soluto, la concentración de la solución, etc., tienen cierta influencia en el efecto de la ultrafiltración.
La aplicación de la tecnología de ultrafiltración para la desalación y concentración de proteínas en el proceso de purificación de proteínas se caracteriza por su idoneidad para el tratamiento de grandes cantidades de líquidos que van desde unos pocos cientos hasta unos miles de litros con las ventajas de simplicidad de operación, ahorro de tiempo. y alta tasa de recuperación de proteínas. El método de ultrafiltración se desarrolla a partir de tubos de ultrafiltración para procesamiento de microvolúmenes en laboratorio, copas de ultrafiltración para procesamiento de pequeños volúmenes y sistemas de ultrafiltración para uso industrial.
La ultrafiltración se subdivide en ultrafiltración de presión directa y filtración de flujo tangencial y, en la actualidad, la filtración de flujo tangencial se utiliza principalmente en la industria, que se utiliza ampliamente en la desalinización y la sustitución del tampón.
El siguiente es un ejemplo de la aplicación de los casetes de membrana de ultrafiltración de Guidling Technology en la desalinización y concentración de proteínas.
Utilizamos un casete de membrana de tamaño de poro de 11㎡ y 10 kd (G01100010K) para desalar y concentrar 500 ml de solución de hormona de crecimiento modificada con PEG a una concentración de 0,2 mg/ml. A lo largo del proceso de ultrafiltración, se examinaron la tasa de desalinización, la tasa de recuperación de proteínas, la condición de falla del flujo de la membrana y la tasa de recuperación del flujo de agua.
Antes y después del uso, probamos el flujo de agua del casete de membrana por separado y la tasa de recuperación de los casetes de membrana alcanzó el 98 % bajo la premisa de mantener la misma velocidad de alimentación, presión de alimentación y presión de reflujo.
Todo el proceso procesó un total de 2 litros de material y tomó 40min, 0-5min fue el proceso de concentración, 5-35min fue el proceso de intercambio de líquido y 35-40min fue el proceso de excesiva concentración. Durante todo el proceso de ultrafiltración, la TMP se estabilizó entre 0,7-0.8 bar, la velocidad de alimentación fue constante y el flujo de material promedio fue de 27 LMH.
2 litros de material líquido concentrado se intercambian a 60 ml, aproximadamente 33 veces concentrado, la tasa de desalinización alcanza el 99 %, la tasa de recuperación alcanza el 80 %, después de un lavado, un aumento de 50 ml de líquido, la recuperación total del 88 %, producción industrial según el volumen muerto de los cálculos de la tubería, en la medida de lo posible para aumentar el número de veces del lavado superior, el lavado superior general 3 veces se puede recuperar por completo.
Los casetes de membrana de Guidling Technology están hechos de materiales inertes de grado médico con una fuerte resistencia a la corrosión y pueden soportar una limpieza alcalina intensa; el uso de un proceso de fabricación automatizado garantiza la continuidad y confiabilidad de la calidad del producto, mayor resistencia mecánica, resistencia a la contrapresión y rendimiento de enjuague repetido; tiene superhidrofilia, lo que puede dar a la membrana un mayor flujo y una menor adsorción de proteínas; También contamos con un diseño de canal de flujo optimizado con una menor caída de presión que facilita la transferencia de material y acorta significativamente el tiempo de filtración.
Nuestros casetes de membrana están disponibles en una amplia gama de tamaños de poro, desde 1 kd hasta 1000 kd. Entre ellos, se pueden utilizar casetes de membrana de ultrafiltración de 1-10kd para desalinización y eliminación de pirógenos; Se pueden utilizar casetes de membrana de ultrafiltración de 30 kd para la concentración de anticuerpos monoclonales y la sustitución del tampón; Al mismo tiempo, nuestros productos de fibra hueca también se pueden utilizar para la concentración y sustitución de productos biológicos, con tamaños de poro de 100 kd, 300 kd y 500 kd, que se utilizan principalmente para una gran cantidad de aplicaciones en productos de vacunas.
Guidling Technology es una empresa nacional de alta tecnología que se centra en productos biofarmacéuticos, cultivo celular, purificación y concentración de biomedicina, diagnóstico y fluidos industriales. Hemos desarrollado con éxito dispositivos de filtrado centrífugo, casetes de ultrafiltración y microfiltración, filtros de virus, sistemas TFF, filtros de profundidad, fibras huecas, etc. que satisfacen completamente los escenarios de aplicación de productos biofarmacéuticos, cultivos celulares, etc. Nuestras membranas y filtros de membrana se utilizan ampliamente en concentración, extracción y separación de prefiltración, microfiltración, ultrafiltración y nanofiltración. Nuestras numerosas líneas de productos, desde filtración de laboratorio pequeña y de un solo uso hasta sistemas de filtración de producción, pruebas de esterilidad, fermentación, cultivo celular y más, satisfacen las necesidades de pruebas y producción. ¡Guidling Technology espera cooperar con usted!
